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轉染試劑的歷史背景
更新時間:2022-06-27 點擊量:
1569
轉染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。DNA轉染技術的發(fā)展對現(xiàn)代分子生物學產生了巨大的影響?;蜣D染技術不僅是研究轉基因和基因表達的重要工具,而且是基因治療的關鍵步驟。理想的基因轉染試劑應該具有如下特點:高效轉染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、經濟。
人們一直在尋找更有效、毒性小同時對研究影響也小的
轉染試劑
。由于脂質類轉染試劑對細胞的毒性是由其脂質特性決定的,眾多的研究者和生物公司將新一代轉染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質體的聚合物上,并已有一些優(yōu)秀的試劑產品上市。
以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術正成為人們研究的方向。但應用的陽離子聚合物轉染試劑,仍然存在轉染效率不高和細胞毒性的問題。新的高分子聚合物轉染試劑是納米聚合物
轉染試劑
,由于采用新技術和新材料,具有高效、安全、低細胞毒性。其原理是:分子內含有許多氨基,在生理PH下會發(fā)生質子化,這些質子化的氨基可以中和DNA質粒表面的負電荷,使DNA分子由伸展結構壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉染復合物主要是通過細胞內吞作用將DNA轉移進入細胞,形成內含體(endosome),DNA從內含體釋放,進入細胞質中,再進一步進入核內轉錄、表達。通過納米技術生產出的轉染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結合保護DNA能力強、毒性低的*性能。
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